VII Curso de Micología Molecular
Michigan State University
May o 22– Junio 1, 2006
Contenido

1) Teoría: Introducción a las técnicas de aislamiento del ADN y ARN de hongos filamentosos y levaduriformes
Laboratorio No 1.
a) Métodos para la extracción del ADN: Rompimiento de la pared y extracción con la técnica fenol-cloroformo. Otras metodologías de extracción
b) Caracterización del ADN por electroforesis en gel de agarosa
Laboratorio No 2.
a) Métodos de extración para obtener ARN total
b) Caracterización por electroforesis en gel

2) Teoría: Aplicación de las técnicas de restricción enzimática
Laboratorio No 3.
a) Análisis con enzimas de restricción
b) Caracterización de las bandas de restricción por electroforesis en gel

3) Teoría: Introducción a las técnicas de PCR
Laboratorio No 4.
Diseño de los iniciadores (primers) para la amplificación del ADN usando la
metodología del PCR.
b) Metodología para la amplificación del ADN por PCR
Evaluación de los amplicones ( productos de amplificación) obtenidos por PCR en gel de electroforesis

4) Teoría: Principios básicos de las técnicas de clonación del ADN
Laboratorios Nos 5 y 6
a) Introducción de fragmentos del ADN en vectores (plásmidos)
b) Transfección de E. coli con plásmidos conteniendo los fragmentos en estudio
c) Detección de los posibles clones positivos.
d) Visualización de los clones positivos por la técnicas de “Cracking gel”
e) Aislamiento, caracterización y manipulación del ADN clonado

5) Teoría: Principios de los análisis usando Southern blot
Laboratorio No 7
Separación del ADN en estudio por electroforesis en gel
Transferencia del ADN en estudio a membranas
c) Uso de sondas del ADN radioactivas (Probes) para la detección específica del ADN en estudio (32P)
d) Lectura del los resultados usando placa de rayos X

6) Teoría: Secuencia del ADN
Laboratorio No 8
Secuencia del ADN clonado en el ejercicio No 5
Secuencia del ADN usando técnicas automatizadas

Leonel Mendoza, M.Sc., Ph.D.
Associate Professor
Medical Technology Program
Microbiology and Molecular Genetics
Michigan State University
322 North Kedzie Hall
East Lansing, MI 48824-1031
USA
Email: mendoza9@msu.edu

Información sobre la Transferencia de fondos:
Para transferir fondos electronicamente o para transferencias por cable, por favor oprimir el emblema:
Pago por medio the Transferencia Elctrónica

Información para pagar por medio de tarjeta de crédito:
Para pagar con tarjeta de crédito, por favor oprimir el emblema:
Pago con tarjeta de Crédito